创意法教育学案：细菌的染色——革兰染色

课题申报实施学案：　　

病原生物学与免疫学实验教程 第一章第一节 细菌革兰染色  　　

王仙　　

实验二 细菌的革兰染色　　

我的学习目标：　　

1. 掌握细菌涂片标本的制作和革兰染色步骤。　　

2. 了解革兰染色法原理.　　

3. 熟悉革兰染色的意义。　　

我的学习过程：　　

1. 革兰染色的方法、结果、原理及意义（20分钟）　　

2. 抗酸染色的方法和原理（10分钟）　　

3. 细菌涂片标本的制作示教（20分钟）　　

4. 学生自己动手操作、观察结果（70分钟）　　

5. 总结（15分钟）　　

一、生活引入　　

1. 细菌是微米级的生物，通过显微镜放大后能否看出差别？是否有颜色？如何更好的区分出他们的差异？从而引入染色法。　　

2. 染色不止用一种染液，当颜色混合时，是否会像实际中的绘画复染一样，产生新的颜色？所以，染色过程中，需要每一步进行脱色处理。　　

目的：引导学生思考：染色的目的是什么？　　

3. 介绍具体步骤，然后示教操作，同时讲解每一步的意义。　　

4. 再次诱导思考：如果省略某些步骤，是否会影响染色结果？带着疑问进行实验操作验证理论，从而加深印象。　　

二、基本功训练　　

1. 知识点学习：　　

知识点1：细菌涂片制备的步骤：      ；       ；      。　　

知识点2：革兰染色步骤：　　

结晶紫染色   分钟，水冲洗甩干；碘液媒染   分钟，水冲洗甩干；     酒精脱色至流出液体无色，约20-30秒，水冲洗甩干；石碳酸复红复染    秒，水冲洗甩干，滤纸吸干，滴加镜油油镜观察。　　

知识点3：绘图：葡萄球菌的形态、大小、颜色，判断染色性；大肠杆菌的形态、大小、颜色，判断染色性。　　

2. 知识点演练：　　

细菌涂片中，固定的意义是什么？　　

革兰染色中媒染的作用是什么？　　

三、题型训练：　　

1. 简述细菌革兰染色的意义有哪些？　　

2. 革兰染色中时间的长短对结果的影响有哪些？ 　　

四、学以致用：　　

1. 如何快速确定我们的袋装食物是否出现污染？　　

2. 如何初步判断一感染患者该使用哪类药物？　　

附：答案和解析：　　

基本功训练：　　

知识点1：涂片，干燥，固定。　　

知识点2：1分钟，1分钟，95%，30秒。　　

知识点3：葡萄球菌直径1微米左右，球形，染成紫色，呈革兰染色阳性；大肠杆菌长度约3微米左右，染成红色，呈革兰染色阴性。　　

知识点演练：　　

固定的意义在于：增加细菌与玻片的粘附性，同时杀菌。　　

媒染的作用：与第一步的结晶紫形成更大复合物，从而在通过细胞壁时，存在革兰阳性菌和阴性菌之间的差异。　　

题型训练：　　

1. 染色的意义：初步判断细菌的结构，生物学性状及指导临床用药。　　

2. 革兰染色时间长短对结果均有影响，时间过长，易导致革兰阴性菌的假阳性，时间过短，易出现革兰阳性菌的假阴性。　　

学以致用：　　

1. 可以在食物中的可疑部位用棉签沾取，然后再玻片上涂片，再按照革兰染色的步骤染色观察，如果发现大量可疑菌，则可以考虑污染。　　

2. 分离感染患者的分泌物，或感染部位的分泌液，做涂片染色，根据染色性大致判断用哪类药物。